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磷酸緩沖液（用于生物化學(xué)研究中的溶液）

次瀏覽 | 更新時(shí)間：2023-05-22

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磷酸緩沖液

用于生物化學(xué)研究中的溶液

磷酸緩沖液（PB，Phosphate Buffer），是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，通常使用的有磷酸鈉緩沖液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸鉀緩沖液（K2HPO4&KH2PO4)，由于它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣。

基本信息

中文名	磷酸緩沖液
外文名	Phosphate Buffer
磷酸緩沖液	PH5.7--8.0
成分	NaH2PO4&Na2HPO4

主要作用

PB(Phosphate Buffered)，主要用于化學(xué)實(shí)驗(yàn)。簡(jiǎn)稱：PB或者PB緩沖液

配制方法

0.2M磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液：

NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液為31.21g/L，

NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液為27.6g/L。

乙液：

Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液為35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液為53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液為71.64g/L。

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)	PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)
5.7	93.5	6.5	6.9	45	55
5.8	92	8	7	39	61
5.9	90	10	7.1	33	67
6	87.7	12.3	7.2	28	72
6.1	85	15	7.3	23	77

展開表格

根據(jù)要求的PH值，取X毫升甲液與Y毫升乙液，混合均勻即得.

1/15M 磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 40.1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 19 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液：一水磷酸二氫鈉,1/15M溶液含9.2g/L

甲液：二水磷酸氫二鈉,1/15M溶液含11.864g/L

根據(jù)要求的PH值，取X毫升甲液與Y毫升乙液，混合均勻即得.

緩沖范圍

磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液，配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范圍在1-5；堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范圍在9-12；中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。

濃度計(jì)算

通常所說(shuō)的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度。正是因?yàn)槿绱?，在配制中性緩沖液時(shí)，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來(lái)的濃度，但是緩沖液中的鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。

優(yōu)缺點(diǎn)

磷酸緩沖液的優(yōu)點(diǎn)：（1）易配制各種濃度的緩沖液；（2）適用的pH值范圍寬，可配置各種pH值的緩沖液；（3）pH受溫度影響較??；（4）緩沖能力強(qiáng)，緩沖液被稀釋后pH變化小。

磷酸緩沖液的缺點(diǎn)：（1）易與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉淀；（2）會(huì)抑制某些生化反應(yīng)過(guò)程，如抑制某些酶的催化過(guò)程等。

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