正文
增強(qiáng)子的序列是含兩組72bp串聯(lián)(順向)重復(fù)序列,核心部分為TGTGGAATTAG。
簡(jiǎn)介
增強(qiáng)子是指能使和它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。作為基因表達(dá)的重要調(diào)節(jié)元件,增強(qiáng)子序列大多為重復(fù)序列,一般長(zhǎng)約50bp,適合與某些蛋白因子結(jié)合。其內(nèi)部常含有一個(gè)核心序列:(G)TGGA/TA/TA/T(G),是產(chǎn)生增強(qiáng)效應(yīng)時(shí)所必需的。
1981年Benerji在SV40DNA中發(fā)現(xiàn)一個(gè)140bp的序列,它能大大提高SV40DNA/兔β—血紅蛋白融合基因的表達(dá)水平,這是發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)增強(qiáng)子。它位于SV40早期基因的上游,由兩個(gè)正向重復(fù)序列組成,每個(gè)長(zhǎng)72 bp。目前發(fā)現(xiàn)的增強(qiáng)子多半是重復(fù)序列,一般長(zhǎng)50bp,通常有一個(gè)8—12bp組成的“核心”序列,如SV40增強(qiáng)子的核心序列是5’—GGTGTGGAAAG—3’。
相關(guān)研究
觀測(cè)位于HPV16 LCR序列YY1結(jié)合位點(diǎn)上游的組織特異性增強(qiáng)子序列對(duì)YY1蛋白的啟動(dòng)子P97抑制作用的影響。方法 構(gòu)建帶有不同長(zhǎng)度的HPV16野生株、啟動(dòng)子遠(yuǎn)端YY1位點(diǎn)突變株、啟動(dòng)子近端YY1位點(diǎn)突變株的5′端LCR缺損序列的熒光素酶報(bào)導(dǎo)質(zhì)粒,以及不同長(zhǎng)度的近端YY1/SP1重疊結(jié)合位點(diǎn)基因工程突變LCR的熒光素酶報(bào)導(dǎo)質(zhì)粒;將各種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到人類子宮頸癌細(xì)胞系C33A中,檢測(cè)在不同LCR序列的控制下對(duì)病毒啟動(dòng)子P97的活性的影響。結(jié)果 去除上游增強(qiáng)子序列后,遠(yuǎn)端YY1位點(diǎn)突變的P97激活作用完全消失,近端YY1位點(diǎn)突變的P97激活作用部分喪失。不同長(zhǎng)度的近端YY1/SP1重疊位點(diǎn)基因工程突變LCR對(duì)P97活性的影響不受上游啟動(dòng)子序列的控制。結(jié)論 YY1蛋白對(duì)啟動(dòng)子P97的抑制效應(yīng)受位于其上游序列的增強(qiáng)子的控制。
人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型的長(zhǎng)控制區(qū)(long control region,LCR)為病毒基因轉(zhuǎn)錄的重要調(diào)節(jié)區(qū)域。在LCR中部有一組織特異性增強(qiáng)子區(qū)域,可在上皮細(xì)胞內(nèi)增強(qiáng)病毒早期啟動(dòng)子P97的活性。增強(qiáng)子是由許多轉(zhuǎn)錄激活因子的特異性結(jié)合位點(diǎn)組成,其中包括有AP1、NF1、Oct1、TEFⅠ等〔1〕。細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白YY1廣泛存在于上皮細(xì)胞胞核內(nèi)〔2〕,對(duì)P97的活性起負(fù)性調(diào)節(jié)作用〔3-5〕。YY1蛋白可通過(guò)多種方式對(duì)不同的啟動(dòng)子活性進(jìn)行正相或負(fù)相調(diào)節(jié),其機(jī)理包括與其它活性蛋白發(fā)生蛋白-蛋白間相互作用〔6〕,與其它活性蛋白競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合相應(yīng)的結(jié)合位點(diǎn)〔7〕,通過(guò)蛋白與DNA結(jié)合引起DNA空間結(jié)構(gòu)的改變〔8〕以及與其它非DNA結(jié)合活性蛋白作用后使后者作用于轉(zhuǎn)錄起始部位〔9〕。
在HPV16 LCR序列上存在有多個(gè)YY1特異性結(jié)合位點(diǎn),分布于增強(qiáng)子和啟動(dòng)子P97之間。由于增強(qiáng)子是由多個(gè)轉(zhuǎn)錄激活因子結(jié)合位點(diǎn)構(gòu)成,因而有可能會(huì)參與YY1蛋白對(duì)P97的活性抑制作用。我們構(gòu)建了不同的HPV16標(biāo)準(zhǔn)序列、啟動(dòng)子遠(yuǎn)端YY1位點(diǎn)和近端位點(diǎn)突變的5′端缺損LCR熒光素酶報(bào)道質(zhì)粒,經(jīng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在除去增強(qiáng)子后YY1結(jié)合位點(diǎn)突變引起的啟動(dòng)子活性增強(qiáng)效應(yīng)明顯減弱或消失。這表明YY1蛋白對(duì)P97的調(diào)節(jié)作用有賴于上游的增強(qiáng)子序列。
相關(guān)詞條
增強(qiáng)體 | 增變株 | 增值 |
增生芽 | 增殖體 | 增生區(qū) |