基本信息

定點(diǎn)誘變:可將病毒的隨機(jī)突變納入人們的規(guī)劃之中,這一技術(shù)可將DNA基因組或RNA基因組的cDNA任何既定部位的核苷酸替換,或者使之缺失,或者插入另一段核苷酸。[1]

方法

為達(dá)到這一目的,一般用分子雜交技術(shù),即將含有特定位點(diǎn)變異的寡核苷酸通過(guò)分子雜交,導(dǎo)入載體DNA,再轉(zhuǎn)化到載體中擴(kuò)增雜交DNA,最后根據(jù)設(shè)計(jì)的分子標(biāo)記,在一定條件下篩選突變株。由于PCR及核苷酸測(cè)序技術(shù)的日益普及,定點(diǎn)誘變?cè)诓《緦W(xué)的應(yīng)用更為方便,它可用于確定病毒基因的致病作用,也可用于研制具有免疫學(xué)標(biāo)記的弱毒病毒疫苗等,受到普遍重視。許多病毒還可作為定點(diǎn)誘變所需的載體,根據(jù)不同目的可選用痘病毒、腺病毒、皰疹病毒、乳頭瘤病毒、披膜病毒等。

在事先不了解特定核苷酸序列功能的情況下,通過(guò)定點(diǎn)誘變產(chǎn)物的分析,推測(cè)該序列編碼的蛋白質(zhì)性質(zhì)及功能,這種利用基因序列資料反過(guò)來(lái)研究動(dòng)物體內(nèi)的遺傳學(xué)效應(yīng)的手段,稱(chēng)之為 反求遺傳學(xué),廣泛應(yīng)用于病毒的遺傳變異研究。